链霉亲和素偶联磁珠

产品货号：

M20012

中文名称：

链霉亲和素偶联磁珠

英文名称：

Streptavidin Magnetic Beads

产品规格：

1ml|1ml×5|1ml×10

发货周期：

1～3天

产品价格：

询价

链霉亲和素偶联磁珠使用纳米表面生物技术将重组中性链霉亲和素共价偶联到超顺磁性磁珠微球表面，形成单分子固定层，可用于生物素化核酸、生物素化抗体或其他生物素化配体和靶分子的分离和检测。由于具有单层的链霉亲和素，其表面的绝大多数生物素结合位点在空间上不仅可以结合游离生物素，而且还可以结合生物素化的配体/靶标，使用简单有效。形状确定的特异性表面便于进行高效捕获、分离和下游操作，可保证批次一致性和结果的可重复性。本制品是以聚合物为基材的实心磁珠微球，主要用于免疫检测、免疫沉淀、分离核酸、细胞分选等。

浓度：10±0.5mg/mL
粒径：1μm
应用：免疫检测、免疫沉淀、细胞分选
自由生物素结合能力：＞2400pmol/mg
Biotin-IgG结合能力：＞60μg/mg
生物素化寡聚核苷酸结合能力：＞1600pmol/mg

产品组成

组分	1mL	1mL×5	1mL×10
链霉亲和素偶联磁珠	1mL	1mL×5	1mL×10
说明书	1份

保存：2～8℃，有效期1年。

用户自备

缓冲液	用途	配方
Wash Buffer I	用于结合生物素化核酸	10mM Tris-HCl,1mM EDTA,1M NaCl,0.01%～0.1% Tween-20,pH7.5。
Wash Buffer II	用于结合生物素化抗体/蛋白	PBS,0.05% Tween-20,pH7.4,0.01%～0.1% BSA(可根据需要添加)。
Elution Buffer I	用于洗脱生物素化核酸	95% Formamide,10mM EDTA,pH8.2。
Elution Buffer II	用于洗脱生物素化抗体/蛋白	0.1M Glycine(pH2.0)。

可根据实验需要调整缓冲液的盐浓度及pH。

本制品pH值为6～8，禁止冻结。
本制品应避免离心、干燥或冻存，禁止长时间置于磁场，可能会引起磁珠聚团，降低结合活性。
从磁珠保存管中移取磁珠前应充分振荡混匀，操作过程中动作应轻柔，并避免产生气泡。
生物素化样品准备过程中，在生物素标记好蛋白或核酸后，用脱盐柱去掉多余的游离生物素。
为最大限度的降低蛋白质降解，请配合使用蛋白酶抑制剂混合物(货号：M20001、M20002)。
生物素化分子的大小会影响磁珠的载量，用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

一、固定化核酸

将磁珠充分混悬，可置于混合器上涡旋振荡20秒，取100μL磁珠到新的1.5mL EP管中，置于磁力架，磁性分离，弃上清液。
- 用户可根据生物素化分子的使用量，参考磁珠的载量，计算需取用的磁珠体积，建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1～2倍，使磁珠结合饱和。
加入1mL Wash Buffer I，充分洗涤磁珠。磁珠洗涤过程：加入对应的buffer到EP管中，盖上管盖，涡旋振荡磁珠15秒，磁性分离，弃上清。重复以上步骤1次。
加入500μL用Wash Buffer I稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为2mg/mL)，充分振荡混悬，置于旋转混合仪上孵育(室温，30分钟；4℃,2小时)。
磁性分离，将上清液移至新的EP管中，以备后续使用。
加入1mL Wash Buffer I，充分洗涤磁珠。磁珠洗涤过程：加入对应的buffer到EP管中，盖上管盖，涡旋振荡磁珠15秒，磁性分离，弃上清。重复以上步骤1次。
- 可通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量。

二、固定化抗体/蛋白：

将磁珠充分混悬，可置于混合器上涡旋振荡20秒，取100μL磁珠到新的1.5mL EP管中，置于磁力架，磁性分离，弃上清液。
- 用户可根据生物素化分子的使用量，参考磁珠的载量，计算需取用的磁珠体积，建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1～2倍，使磁珠结合饱和。
加入1mL Wash Buffer II，充分洗涤磁珠。磁珠洗涤过程：加入对应的buffer到EP管中，盖上管盖，涡旋振荡磁珠15秒，磁性分离，弃上清。重复以上步骤1次。
加入1mL用Wash Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1mg/mL)，充分振荡混悬，置于旋转混合仪上旋转孵育(室温，60分钟；4℃,4小时)。
磁性分离，将上清液移至新的EP管中，以备后续使用。
加入1mL Wash Buffer II，充分洗涤磁珠。
磁珠洗涤过程：加入对应的buffer到EP管中，盖上管盖，涡旋振荡磁珠15秒，磁性分离，弃上清。重复以上步骤4次。

三、洗脱

生物素标记核酸的洗脱：
向磁珠中加入50～100μL Elution Buffer I，65℃孵育5分钟或90℃孵育2分钟，置于磁力架，磁性分离，收集上清。
生物素标记抗体/蛋白的洗脱：
本说明书提供以下两种洗脱方案，操作者可根据后期检测的需要选择不同的洗脱方法。
- 变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于SDS–PAGE检测。
  步骤：向磁珠中加入50～100μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合均匀，95℃加热5分钟。置于磁力架，分离磁珠，收集上清，进行SDS-PAGE检测。
  - 如果选择变性洗脱，那么洗脱液将包含链霉亲和素单体和聚体、生物素标记抗体或蛋白。
- 非变性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。
  步骤：向磁珠中50～100μL Elution Buffer II，室温孵育5～10分钟。置于磁力架，分离磁珠，收集上清至新的EP管，并立即滴入总体积1/10体积的中和缓冲液(0.1M NaOH)，将洗脱产物pH调节至中性，样品用于后期功能分析。
  - 如果选择非变性洗脱，酸性条件下链霉亲和素可能会脱落，需注意孵育时间不要超过10分钟；酸性洗脱液能破坏大部分的抗体与抗原的相互作用，但为了更好的洗脱效果，可预先用1mL 0.1% Tween-20的水溶液洗涤磁珠1次。

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